化学实验经验：[2]液相色谱操作流程

液相色谱仪（安捷伦为例）

紫外检测器

在做液相分析之前，首先要制备流动相（液相分离时间较长，如果样品较多，可以提前一天晚上配好流动相纺织与冰箱中储存）

液相流动相的制备，首先按照文献找到需要的有机相和水（有的时候水还需要加些盐或酸碱，并且用于流动相的溶剂必须为色谱纯，而水也必须是超纯水）

这两个溶液必须要过膜处理，一般有机相过0.22um的有机相膜，水过0.45或0.22um的水相膜，过完之后，需要放到超声上进行脱气处理（一般超声十五分钟左右），静止到常温

打开色谱仪的各个工作模块和色谱工作站，预热十分钟左右，将流动相放置好。等仪器预热结束后，点击purge（脱气），主要是去除管道中的气体

脱气结束后，下面就是编辑方法（内容包括流动相比例、流速、柱温，运行时间等，具体数值可根据文献来设），编辑完后可以保存方法以便下次使用，也可以提前编辑好方法，然后直接调出方法，

点击运行，观察工作站上基线运行情况，等基线平稳之后，下一步就是进样了，液相的流动相分为自动进样和手动进样（此处不详细描述）

进样后，工作站会自动记录数据。当样品分析结束后，可以手动结束，也可以根据设置时间等他自行结束，接着保存数据

下一步就是冲洗色谱柱，一般是逐步提高有机相的比例，直到为100%的有机相（甲醇或乙腈），再冲半小时左右，就可以结束了

关闭工作站，关闭各个色谱工作模块电源即可，如果色谱柱长时间不用，需要将色谱柱拆下，用堵头将两侧的口堵住