五日生化需氧量(BOD5)的测定

生活污水与工业废水含有大量有机物,这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧,从而破坏水体中氧的平衡,使水质恶化。生化需氧量是属于利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧,用来表示水体中有机物的含量的一个重要指标。生化需氧量的经典测定方法,是稀释接种法。稀释接种法:1、方法原理生化需氧量是指在一定条件下,微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程消耗溶解氧的量。于恒温培养箱内在201℃培养5天,分别测定样品培养前后的溶解氧,二者之差既为BOD5值,以氧的mg/L表示。本方法适用于测定BOD5范围:2mg/L6000时,会因稀释带来误差。仪器:(1)恒温培养箱(2)5—20L细口玻璃瓶(3)1000—2000ml量筒(4)玻璃棒:50ml,棒的底端固定一个10号的带有几个小孔的橡胶塞。(5)溶解氧瓶(碘量瓶):250—300ml试剂:(1)磷酸盐缓冲溶液将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4),21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4),33.4g七水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O),和1.7g氯化铵(NH4Cl)溶于水中,稀至1000ml。此溶液PH值为7.2(2)硫酸镁溶液将22.5g七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中,稀至1000ml(3)氯化钙溶液将27.5g无水氯化钙溶于水中,稀至1000ml。(4)氯化铁溶液将0.25g六水合氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水,稀至1000ml。(5)盐酸溶液(0.5mol/L)将40ml浓盐酸溶于水,稀至1000ml。(6)氢氧化钠溶液(0.5mol/L)将20g氢氧化钠溶于水,稀至1000ml。(7)葡萄糖—谷氨酸标准溶液将葡萄糖和谷氨酸在103干燥1小时后,各称取150mg溶于水中,移入1000ml容量瓶中稀至标线,临用前配制。(8)稀释水在5—20L玻璃瓶中装入一定量的水,控制水温在20℃左右,用曝气机曝气2—8小时,使稀释水中的溶解氧接近饱和。瓶口盖以两层纱布,置于20℃培养箱内放置数小时,使水中溶解氧含量达到8mg/L左右。临用前向每升水中加入氯化钙、硫酸镁、氯化铁、磷酸缓冲液各1ml,混匀。(9)接种液可选用以下几种:①一般生活用水,放置一昼夜,取上清夜。②表层土壤水,取100g花园或植物生长土壤,加1升水,静置10分钟,取上清夜。③污水厂出水④含有城市污水的河水或湖水(11)接种稀释水每升稀释水中接种的加入量:生活污水1—10ml;表层土壤水20—30ml;河水或湖水10-100ml。接种稀释水pH值为7.2,配制后应立即使用。3、水样的测定(1)不经稀释的水样的测定①将混匀水样转移入两个溶解氧瓶中(转移中不要出现气泡),溢出少许,加塞。瓶内不应留气泡。②其中一瓶随即测定溶解氧,另一瓶口水封后放入培养箱,在20±1℃下培养5天③5天后,测定溶解氧。④计算:—水样在培养前的溶解氧浓度—水样在培养后的溶解氧浓度(1)经稀释水样的测定:⑴一般稀释法①按选定的稀释比例,在1000ml量筒内引入部分稀释水;②加入需要量的混匀水样,再引入稀释水(或接种稀释水)至800ml;③用带胶板的玻璃棒上下搅匀。搅拌时胶板不要露出水面,防止产生气泡;④将水样装入两个溶解氧瓶内,测定当天溶解氧和培养5天后的溶解氧。⑤稀释水同样培养作空白实验,测定5天前后的溶解氧。注意事项:(1)水样pH值应在6.5—7.5范围内,若超出可用盐酸或氢氧化钠调节pH近于7。(2)水样在采集和保存及操作过程中不要出现气泡(3)水样稀释倍数超过100时,要预先在容量瓶中用蒸馏水稀释,再取适量进行稀释培养。(4)检查稀释水和接种液的质量和化验人员的水平,可将20ml葡萄糖—谷氨酸标液用稀释水稀至1000ml,按BOD的步骤操作,测得的值应在180—230mg/L之间,否则,应找出原因所在。(5)在培养过程中注意及时添加封口水。