胚胎干细胞研究员培养日记

胚胎干细胞的培养往往都会需要研究人员付出大量的时间和心血，几乎除了复苏和传代以外每天都需要更换培养基。并且在进行复苏和传代时很容易会出现生长停滞等现象，因此就需要研究人员每天对培养中的胚胎干细胞进行仔细的观察，MEF在培养的时候必须两天之前开始准备，如果准备MEF那么传代时就会因此而放慢速度。在培养中的HUES细胞系我通常可以观察到染色体的改变包括12三体（在两个细胞系：hVES-3和4）和其它改变（HUES-12号染色体增加）。染色体的增加和异常跟双链期短有着很重要的关系。在培养时出现染色体异常是很常见的问题，因此要增加染色体分析的频率。第一天复苏人胚胎干细胞四小时之后，使用四倍光学显微镜观察，这是可以看到有一些碎屑，现在出现是正常现象没有担心的必要，出现碎屑说明有死细胞混合物夹杂其中。早培养的早期基本上市不可能看到细胞团的，如果死细胞过多已经能够覆盖住培养皿，这时应该更换部分培养液。第二至四天复苏细胞后四十八小时进行第一次换液，将培养液完全更换，建议2ml/well，复苏第二天后可能会看到部分细胞团，然后每天都要进行换液。第四至七天根据以往培养的经验来说，复苏细胞后的4~10天就需要进行传代，因为这是的MEF细胞已经太老。传代前的几天会依赖相当多的因素，其中的因素有细胞复苏的状态、培养时间等等，如果需要咨询具体的操作步骤也可以与济南中赛生物进行联系。