多语言展示
当前在线:1636今日阅读:86今日分享:14

用干重比色法测定微生物量的方法

最近小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于用干重比色法测定微生物量的方法的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。
方法/步骤
1

首先,是菌种培养,基倒平板,待凝固后从斜面上挑取少量E.coli,熔化牛肉青蛋白陈培养随即在华板上划线接种,并将其平板倒置37C恒温培养24h以得到大量菌体。制备菌液,用磷酸盐缓冲液将培养好的菌体洗下并分装到两支离心管中。

2

然后,进行离心,以3 500 r min转速离心10 min,弃去上清液,再用磷酸盐缓冲液冲洗两次。弃去上清液,以除去残留在培养液中的有机物。

3

然后,进行烘干并称重,将离心管放在105C烘箱中,烘至恒重,然后分别称0.4.0.8.1.2.1.6.2 .0mg菌体、分装于洁净的试管中。

4

然后,进行加试剂,先加1ml蒸馏水于不同千重菌体的试管中,将菌块打散,制成均匀的菌液后再按表1一顺序加人其他试剂。

5

然后,测OD值待试管冷却后进行,打开光度计电源,预热20 min.调节“0”电位旋钮使电表指针处于“0”位,选用620mm波长,然后合上比色皿暗盒盖,使光电管受光,旋转100%的电位器旋钮,使电表指针处于透光率100%处。连续调整电表指针处于“0”和“100%”处数次,待稳定后再开始测定。

6

最后,将空白对照溶液放在比色架第一格内,上述的菌液放入其余三格中,合上暗盒盖,旋转调节100%电位,使指针正确地指在“100%”处(即吸光度为0)。然后轻轻地拉出拉杆,使被测溶液依次置于光路中,这时指针所指的读数即为该溶液的光密度值(OD)。

推荐信息