有的朋友都知道核糖体普遍被认为是细胞中的一种细胞器,除哺乳动物成熟的红细胞,下边小编介绍一下分离核糖体的实验步骤。
工具/原料
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离心机
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试管
方法/步骤
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我们可以从剩余的细胞组分中分离核糖体,在把不含细胞碎片的粗制裂解液以1:1的比例铺到1.1 mol/L的蔗糖溶液之上即可。
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然后我们在更换蔗糖铺垫液2至3次直到获得干净的沉淀物,产甲烷菌、盐杆菌及硫代谢嗜热菌,应用高盐溶液洗两次以确保将非核糖体沉淀去除掉即可。
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我们以100000g离心24小时,还要在沉淀中含有多核糖体,可以用重悬缓冲液洗沉淀物,然后在悬于200μl重悬缓冲液中即可。
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最后我们在以55000g离心12小时,除去蔗糖,我们在于4℃以10000g离心10分钟使悬液澄清,将含有核糖体的沉淀贮存于-80℃就可以了。
总结
1.我们可以从剩余的细胞组分中分离核糖体。2.然后我们在更换蔗糖铺垫液2至3次直到获得干净的沉淀物。3.最后我们在以55000g离心12小时,除去蔗糖。
注意事项
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我们在做实验的时候,一定要注意安全。
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以上自己见解,希望可以帮到大家。
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