BOD-100K型微机BOD测定仪1台
试剂，样品
测定原理搅拌器置于培养箱内，并按预先选择的量程及测量范围，定量体积的水样倒入培养瓶，放在搅拌器上连续搅拌。培养箱内温度控制在20℃±1℃，水样恒温后进行五日培养。培养瓶中必须保证足够的溶解氧。样品中的有机物经过生物氧化作用，转变成氮、碳和硫的氧化物，在这一过程中，从水样中跑出来的唯一气体二氧化碳被氢氧化钠（或氢氧化钾）吸收。因此，瓶中空气压力减少量，相当于微生物所消耗的溶解氧量，这样，样品BOD5值与瓶中空气压力减少的程度成正比，通过测量空气压力的变化可以得到BOD5值。增加或减少所取样品的量可以增加或降低压力减少值。这样操作者无须繁杂的稀释步骤就能准确测量很宽范围的BOD5值。培养瓶中空气压力的变化是通过半导体压力传感器来进行检测的，由LCD显示器循环显示各样品的BOD5值及生化反应曲线。
1 实验前准备工作1.1 实验前将生化培养箱接通电源，并使温度控制在20℃下正常运行。1.2 将实验用的稀释水、接种水和接种的稀释水放入培养箱内恒温备选用。2 水样预处理2.1 调节PH值若样品或稀释后样品 pH 值不在 6～8 范围内，用0.5mol/L的盐酸溶液或0.5mol/L的氢氧化钠溶液调节其 pH 值至 6～8。盐酸溶液（0.5mol/L）的配制：将40ml（ρ=1.18g/ml）盐酸溶于水，稀释至1000ml。氢氧化钠（0.5mol/L）的配制：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000ml。2.2 除氯含有少量游离氯的水样，一般放置1-2h后，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间内不能消失的水样，可加入适量的亚硫酸钠溶液，以除去游离氯。 2.3 温度的影响从水温较低的水体中或富营养化的湖泊中采集的水样，应迅速升温至20℃左右，以赶出水样中过饱和的溶解氧。否则会造成分析结果偏低。从水温较高的水体中或废水排放口取样，应迅速使其冷却至20℃左右，否则会造成分析结果偏高。3 接种液如被检验样品本身不含有足够的适应性微生物，应采取下述方法获得接种水。接种温度应在20±l℃。城市污水，一般采用住宅区生活污水，过滤后在20℃培养箱内放置一昼夜，取上清液作为接种水。待测样品经生化处理构筑物的出水处的出水。当工业废水中含有难降解有机物时，取该工业废水排放口下游3-8Km 处的水作为做接种水；如无此种水源采用驯化菌种的方法在实验室培养含有适应于待测样品的接种水，建议采用如下方法：取中和或适当稀释后的该水样进行连续曝气，每天加少量新鲜水样。同时加入适量表层土壤、花园土壤或生活污水，使能适应水样的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或分析其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适应的微生物已经繁殖，可用做接种水。一般驯化过程需要3-8d。4 配制营养缓冲液我们提供给用户复合营养缓冲液试剂，用户也可以自行配制营养缓冲液，可降低成本.配制方法可参考HJ505-2009---《水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法》进行配制。5 BOD标准溶液的配制将无水葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-CHOO）在103℃下干燥1h，各称取150mg溶于蒸馏水，在1000ml容量瓶中稀释至刻线。此溶液的BOD5为210±10mg/L，先用现配。该溶液也可少量冷冻保存。融化后立刻使用。
测定方法将所采集样品加热或冷却至20±1℃，按照下表将水样、接种液、营养缓冲液、硝化抑制剂（视情况）加入样品瓶，再用蒸馏水补充至总容量的体积数。将氢氧化钾加入密封杯中(密封杯壁上有四个小孔供二氧化碳与氢氧化钾颗粒接触)，将密封杯放入瓶口，使瓶口完全密封.然后将BOD测试瓶放人测定仪，拧紧瓶盖，放人恒温培养箱，打开电源开始测定，随着时间变化，在显示屏上将出现一条曲线，通过曲线可直接读出不同时刻的BOD值. 说明： 1) 一般情况下建议接种液加入量为20 mL。必要时调整接种液加入量，以获得最佳测试结果；2）若待测水样中本身已经含有充足的微生物，则可以不加入接种液，而直接取水样的体积数为总容量的体积数。稀释因子皆为1。3) 若试样中含有硝化细菌，有可能发生硝化反应，需加入一颗硝化抑制剂。计算修正结果：BOD修正值= BOD仪器读值 × 稀释因子
国标5日培养法
配生化培养箱