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怎样收获鸡胚尿囊腔病毒

某些感染禽类的病毒能在鸡胚内很好的繁殖,比如禽流感病毒、新城疫病毒和传支病毒等,因此运用病毒能在鸡胚生长繁殖的原理可以对此类病毒进行深入的研究,含毒尿囊液也是某些生物制品的基础原料。那么,怎样收获含毒尿囊液呢?下面是小编的经验。
工具/原料

含毒spf鸡胚,注射器或移液器,碘酊,酒精棉,蜡块,酒精灯等

方法/步骤
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鸡胚消毒将已接种病毒的鸡胚置于37℃、72h后(具体要根据病毒的繁殖特性确定时间)取出,放入4℃冰箱冷置5h,然后在鸡胚的气室一侧先用碘酊消毒,再用酒精棉脱碘。

3

敲碎蛋糟宿民壳将消毒好的鸡胚放入生物安全柜进行试验,首先用大镊子将鸡胚气室一侧的蛋壳敲碎,剥离蛋壳,注意不要戳破蛋壳膜,以免造成污染。

4

挑破绒尿膜另取一把无菌小镊子,在鸡头一侧,将蛋壳膜和侵肺绒尿膜挑破,让尿囊液充分的流出来。

5

收获尿囊液经尿囊腔途径接种病毒材料后,病毒会通过胚体的体液循环到达胚体内部繁殖,并不断的在尿囊腔积累,使得尿囊液含毒量增高。取无菌移液器吸头一支,压住鸡头后,再用移液器吸取尿囊液,直至全部收获完毕。

6

病毒材料保存尿囊液全部吸出后,可置于玻璃器皿中保存,短期置于-20℃,长期保棍菌存要置于-70℃或冻干。

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废弃物处理从生物安全的角度考虑,试验废弃的材料都要经高压灭菌后方可丢弃,否则会造成某些病原的传播。

注意事项
1

鸡胚繁毒除尿囊腔途径外,还有绒尿膜途径、卵黄囊途径、羊膜腔途径等,可根据实际情况选择。

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