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小麦面粉中的呕吐毒素怎么检测?

呕吐毒素主体成分为DON(deoxynivalenol, 脱氧雪腐镰刀菌烯醇),属于单端孢霉烯族化合物,主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外,头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种,是一类强有力免疫抑制剂,所引起典型症状是采食量降低,所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素(DON)是其中最重要一种毒素,主要来自镰刀菌属(Fusarium),尤其是禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)和黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)。由于它可以引起猪的呕吐,故又名呕吐毒素(vomitoxin,VT)。呕吐毒素是食品中常见的真菌毒素,在自然界中广泛存在,通常在欧洲及北美发现的3种毒素是脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇和15-脱氧雪腐镰刀菌烯醇。由于它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质,因此,对人类及动物的健康构成了威胁,特别是对免疫功能具有明显的影响。根据DON的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激。当人摄入了被DON污染的食物后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统造成死亡。由于中国传统饮食习惯中粮谷比例大大高于西方,使得呕吐毒素的危害更为突出。1998年,在国际癌症研究机构公布的评价报告中,呕吐毒素被列为3类致癌物。欧盟要求呕吐毒素要小于1.0mg/kg;中国饲料要求低于1ppm。
工具/原料
1

呕吐毒素荧光定量快速检测卡

2

荧光定量免疫分析仪

3

卡片孵育器

4

移液器,离心机,混匀仪,电子天平

方法/步骤
1

取有代表性的小麦样品300~500g,粉碎

2

过20目筛,混匀

3

称取1 ±0.05g待测样品于10ml离心管中,加入5ml提取

4

将试剂盒中的提取液取出

6

然后放到混合仪上旋涡震荡5min或放在要床上摇晃8min

7

振荡结束后,4000rpm离心2min(如未配置离心机,可静置8~10min待明显分层

8

取50ul上清到500ul样品稀释液,混匀后备用

9

将呕吐毒素定量检测卡拆开

10

将试纸卡放在37℃孵育器上100ul加样,反应8min

11

时间到后,进行读数,打印结果

注意事项
1

检测卡需要在2-10℃的环境下保存

2

试剂盒要提前回温到室温

3

提前插入IC卡和条形码确认批号和时间一致

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