小RNA是一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,主要包括miRNA、piRNA和siRNA等;它的功能主要是诱导基因沉默,参与基因转录后调控,在发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细抱增殖和凋亡等环节起着重要调控作用。 小RNA测序目标: 1. miRNA长度,茎环结构,miRNA前体加工,靶基因结合位点和预测; 2. 转录组和小RNA数据的联合分析。
工具/原料
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高通量测序平台:Hiseq等
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生物信息学分析
方法/步骤
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一、技术流程
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二、生物信息学分析内容 1. 测序质量分析与统计、评估; 2. microRNA,rRNA,tRNA,intron,exon,snRNA,snoRNA注释; 3. microRNA的表达量差异分析; 4. microRNA表达模式聚类分析; 5. microRNA保守性分析; 6. microRNA与靶基因之间的调控, microRNA靶基因之间的蛋白-蛋白相互作用网络分析; 7. 靶基因预测; 8. 新miRNA预测。
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三、结果展示 1. 数据库使用 2. 版图展示
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四、样本要求 总量:〉4 µg RNA;浓度:〉50 ng/µL