树突状细胞DC的培养，现在介绍一下常规的培养方法。
工具/原料
1640培养基，FBS，100mm平皿，6孔板，吸管，细胞因子（GM-CSF,IL-4）
方法/步骤
1
从液氮灌里复苏一支PBMC或者是新鲜分离的PBMC。
2
加10ml 1640培养基培养在100mm平皿中，培养箱中放置4小时。
3
吸走悬浮细胞（PBLs）用DMSO冻存，贴壁细胞用PBS洗涤三次。
4
再用PBS将贴壁细胞吹下来，离心后用台盼蓝进行染色计数。
5
再细胞培养于6孔板中，同时加细胞因子GM-CSF和IL-4，浓度为1000IU/ml。
6
每隔一天半量换液，同时补加细胞因子。第6天时加入细胞因子TNF-a，继续培养到第8天，即为成熟的DC。能明显看到细胞表面树突状增多，细胞表面积增大。
注意事项
1
注意无菌操作
2
如果条件允许的话可以尝试用CD14磁珠直接分离出单核细胞
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