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将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上的具体步骤

最近小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上的具体步骤的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。
方法/步骤
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首先,在含有选择性抗生素的琼脂平板上,先放一张含有硝酸纤维素的滤膜,并用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上。

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然后,再转移至含有选择性抗生素但未放滤膜的琼脂主平板上,按照一定的格子进行划线接种,每个菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。

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然后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落,再倒置平板,于37摄氏度下培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。

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然后,用已经装了防水黑色绘图墨水的注射器针头穿透滤膜直至琼脂,在三个以上的不对称位置做标记,在主平板大致相同的位置上也做标记。

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然后,用Parafilm 封口膜进行封好主平板,倒置储存放置在4摄氏度下,直至获得杂交反应的结果。

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最后,进行裂解细菌,使释放的DNA结合于硝酸纤维素滤膜上。

注意事项
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上述方法为小编整理所得,希望能够帮助到大家。

2

上述图片来源于网络,可能与方法不符。

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