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PCR实验室各区的作用功能

PCR实验室是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学各个领域,实验室原则上分为4个单独的工作区域,前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,实际包括试剂准备区/样品制备区/扩增区/扩增产物分析区。 每个区域的作用和功能分别满足不同的实验操作。本文源于PCR实验室建设指导 北京航天科恩 工程师口述 本人文字编辑而成
工具/原料
1

试剂准备区

2

样品制备区

3

扩增区

4

扩增产物分析区

方法/步骤
1

试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。未设缓冲间的试剂储存和准备区,工作区域为正压。用于扩增的试剂应冰冻储存。

2

样品制备区:实验室样品的混样和测试样品的制备。未设缓冲间时工作区域为负压或减压,可安装排风系统。所用的器具在使用前应经过彻底清洗并消毒,防止交叉污染。

3

扩增区:PCR扩增反应体系的配制和模板的加入,核酸扩增。未设缓冲间的扩增区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。加样应在超净工作台(生物安全柜)內进行,超净工作台的气流方向宜选择垂流式。

4

扩增产物分析区:扩增产物的测定。未设缓冲间的扩增产物区,工作区为负压或减压,应安装排风系统。若实验仅采用全自动扩增检测仪(如实时荧光定量PCR仪),可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区

注意事项
1

前三个区必须有一个缓冲间,供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。

2

每一区域都须有明确的标记,工作按试剂准备区、样品制备区、扩增区至产物分析区单一流向进行

3

各区的仪器设备包括工作服、鞋、实验记录本和笔等都必须专用

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