DNA染色是做细胞周期的重要环节,可以说染色的好坏,直接影响检测结果。
工具/原料
DNA 染液,一般用PI
步骤:
1
吹打使其为细胞悬液,并且用PBS进行清洗.
2
离心细胞,1000r/min,10min,吸走上清夜。
3
固定细胞:加入固定buffer,15-30min,4℃。
4
涡旋(使细胞分开),加入5mL的70-80%的乙醇到细胞中。-20℃孵育2h。
5
清洗两次以去除乙醇。先用1X的PBS清洗,再用染液进行第二次清洗。
6
离心细胞,10min,1000-1500r/min,吸走上清液。
7
染色:调整细胞为10^6细胞数/test:加入0.5mL的PI/RNAse 染液。
8
室温孵育15min。
9
样品上机分析。
注意事项
1
细胞固定好后,1年内测定都是ok的!
2
PI/RNAse保存于4℃。
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