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分子生物学重点知识归纳是什么

一、真核基因组的结构特点:1.编码序列所占比例远小于非编码序列。2.高等真核生物基因组含有大量的重复序列。3.存在多基因家族和假基因。4.基因通过可变前接能改变蛋白质的序列。5.真核基因组DNA与蛋白质结合形成染色体。二、半保留复制的概念。1.DNA复制时除代DNA双螺旋解开成为两条单链。2.自作为模板按照碱基配对规律合成-条与模板相互补的新链,形成两个子代DNA分子。3.每一个子代DNA分子中都保留有一条来自亲代的链。三、半不连续复制。1.DNA双螺旋结构中两股单链反向互补平行,一股链的方向为5' →3',另一股链的方向为3'→5'。2.复制时合成的互补链方向则对应为3'→5和5'→3' ,而生物体内DNA的合成方向只能是5'→3’。3.复制时,顺着解链方向生成的一股子链其合成方向与解链方向相同,合成能连续进行,称为前导链。4.而另一股子链的合成方向与解链方向相反,它必须等待模板链解开至一定长度后 才能合成一段 ,然后又等待下一段模板暴露出来再合成合成是不连续进行的,称为后随链。5.这种前导链连续复制而后随链不连续复制的方式称为半不连续复制。在复制中不连续合成的DNA片段称为冈崎片段。四、真核生物的DNA聚合酶a、β、γ、δ、ε。1.DNA聚合酶δ是复制中最重要的酶,主要负责子链的延长,相当于原核生物的DNA聚合酶Ⅲ。2.DNA聚合酶a主要催化合成引物。3.聚合酶β、ε参与染色体DNA的损伤修复。4.聚合γ复制线粒体DNA。五、DNA复制是如何实现高保真性的。生物体至少有3种机制实现复制保真性:①严格遵守碱基配对规律:A-T配对,G-C 配对。②聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能:原核生物DNA pol Ⅲ对嘌呤不同构型表现不同亲和力,从而实现其选择功能。③复制出错时有即时校对功能:在复制过程中一旦DNA新生链3'端出现与模板错误配对的碱基时,DNA聚合酶I即能迅速识别,并利用3'→5'核酸外切酶活性切除错配的核苷酸,然后再通过其5’→3’聚合酶活性连接正确配对的核苷酸。此过程称错修复。六、原核生物复制中参与DNA解链的相关蛋白。解链过程主要由DnaA、B、C三种蛋白质共同参与。还有DnaG、SSB、拓扑异构酶。1.DnaA蛋白辨认并结合于串联重复序列上(AT区),几个DnaA蛋白相互靠近形成DNA蛋白质复合体结构,可促使AT区的DNA进行解链。2.DnaB蛋白(解旋酶)在DnaC蛋白协同下,结合并沿解链方向移动,解开双链,并置换出DnaA,初步形成复制叉。3.解链的同时SSB结合在解开的单链上,保护单链模板。4.DnaG(引物酶):催化RNA引物生成。5.在解链过程中由拓扑酶来理顺DNA链。DNA拓扑异构酶II把DNA由正超螺旋变为负超螺旋,更好地起模板作用。七、逆转录酶的三大活性。1.RNA指导的DNA聚合酶活性。2.DNA指导的DNA聚合酶活性。3.RNase H 活性,作用需Zn²+为辅助因子。八、从单链RNA到双链DNA的生成可分为三步。1.逆转录酶以病毒基因组RNA为模板,催化dNTP聚合生成DNA互补链,产物是RNA/DNA杂化双链。2.杂化双链中的RNA被逆转录酶中有RNase活性的组分水解,被感染细胞内的RNase H也可水解RNA链。3.RNA分解后剩下的单链DNA再用作模板,由逆转录酶催化合成第二条DNA互补链。九、重组修复。当DNA双链断裂时,需要重组修复。重组修复是指在重组酶系的作用下,将另一段未受损伤的DNA移到损伤部位,提供正确的模板,进行修复的过程。“边修复,边复制”。1.同源重组修复:参加重组的两段双链DNA在大于200bp的范围内序列相同,修复后的序列正确。大肠杆菌和酵母在同源重组修复中起关键作用的是ReoA蛋白。2.非同源末端连接的重组修复:参加重组的两段双链DNA同源性低,修复后的序列中可存在错误,修复不精确。此方式是哺乳动物细胞DNA双链断裂的一种修复方式,起关键作用的是DNA依赖的蛋白激酶(DNA-PK)和XRCC4。十、简述原核生物的转录终止方式。①依赖p因子的转录终止:p因子是一种蛋白质。当核心酶移动到终止子时,p因子与其结合并发挥解旋酶活性,解开DNA-RNA杂合双链,使新合成的RNA从模板链上脱落下来,转录终止。②非依赖p因子的转录终止:核心酶沿模板移动到DNA的终止子序列时,按照该序列转录合成的RNA有两个特征:富含GC碱基对的发夹结构和一串U序列。发夹结构可影响RNA与模板链的结合,并阻止核心酶前进;U序列则进一步降低RNA与模板链的结合力,从而使转录合成的RNA与模板链分离。随后核心酶与双链DNA解离,转录终止。
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