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BIOGHSC Super Probe Kit

IOGHSC Super Probe Kit生产的经化学修饰的热启动聚合酶,有效避免了非特异扩增,具有高度的特异性。反应缓冲液经多次优化,与热启动聚合酶具有最为乐观的搭配,使聚合酶的活性能够得到最大程度的发挥。反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟的时间。在20ul的反应体系里,只要有几个拷贝的DNA分子就能被检测出来。
工具/原料
1

ddH2O ,2×BIOGHSC Super Probe Master mix ,50×ROX Reference Dye ,Taq酶保护液

2

上下游引物 (10μM) ,模板DNA ,探针

方法/步骤
1

1、BIOGHSC Super Probe Master Mix包含dNTP Mix、Mg2+、BIOG热启动聚合酶、荧光保护素。

2

2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.2μM可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时,可以在0.1-1.0μM范围内调整引物浓度。

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3、探针终浓度可以在0.15μM-0.30μM之间调整。4、qPCR反应灵敏性高,模板量的准确性对结果影响很大,建议将模板适度稀释后加入,或用50ul反应体系。

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5、模板体积最好不超过反应体积的10%,操作尽量在超净台中进行,以防气溶胶污染。6、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内,最好为100-200bp。

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7、配制反应体系时,避免震荡混匀,以防气泡产生。8、反应条件:95℃加热6-10分钟,以激活热启动DNA聚合酶,然后95℃ 5-15秒,60℃ 30-35秒,35-40个循环。反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值等适当调整。

注意事项
1

所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶残留。

2

本产品仅用于科研 ;-20℃保存条件下,有效期为10个月。

3

干冰或蓝冰运输,-20°C避光保存,避免反复冻融。如每次使用量较少,推荐小份分装使用。

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