菌落总数：是指水的单位容积（一般为1ml）所含的、能在营养琼脂平板上在37℃培养24h所生长的细菌菌落的总数。本法测定原理为：根据细菌不同生理特性，选用不同营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质)，分别培养细菌。所以实际工作中，一般根据要求对存在于水样的细菌在中温下于营养琼脂培养基上产生的集落数进行测定，该测定结果仅包括在此条件下生长的细菌总数。
工具/原料
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实验器材：灭菌吸管，灭菌平皿、
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实验试剂：琼脂，水样
方法/步骤
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1、以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾倒约15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每份水样做平行样，并另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
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2、待琼脂凝固后，翻转平皿，置于37℃恒温箱内培养24h，计数每个平皿的菌落数。
注意事项
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1、全过程无菌操作
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2、采集水样前，应先消毒水龙头并进行放水。对盛装水样用玻璃瓶内应先加入1ml的3%Na2S2O3*5H2O中和水中余氯，阻止其继续灭菌
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3、操作准确，避免污染
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4、融化后的琼脂可存放于44℃～45℃水浴中备用
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