微生物实验前,我们需要提前准备无菌稀释液(通常为0.85%无菌生理盐水)。下面分享下实验无菌生理盐水的配制与灭菌过程。
工具/原料
1
氯化钠
2
蒸馏水/蒸馏水容器/蒸馏水器
3
玻璃棒/烧杯/量筒/稀释液容器(含有刻度225ml)
4
10ml吸管/洗耳球
5
高压灭菌锅
方法与步骤
1
蒸馏水提前准备:按照蒸馏器使用方法进行操作,制取蒸馏密封备用。
2
0.85%生理盐水的配制:称取8.5g氯化钠溶于1000ml的蒸馏水,用玻璃搅拌棒搅拌均匀,使之快速溶解均匀。
3
生理盐水的分装:①将溶液分别倒入具有225ml刻度的稀释液容器中。②用10ml吸管和洗耳球将溶液吸取9ml分别移至试管中,并用胶塞塞住试管口,至于试管架中。
4
生理盐水的灭菌:调整确定灭菌时间与温度。灭菌温度:121℃灭菌时间:15min
5
取出生理盐水冷却:关闭电源,打开高压灭菌锅盖子,取出灭菌后的生理盐水,放置冷却区域自然冷却。备注:此处所采用的为全自动高压灭菌锅。如果使用老式高压灭菌锅,关闭电源,打开放气阀,将气体至排空,直至压力降为0,才能打开灭菌锅,否则将导致安全事故发生。
6
将冷却后的无菌生理盐水放于冷藏冰箱内,并做好标识:配制日期、配制人、使用截止日期等一般保存3-5天,化验室相关文件要求。备注:做微生物实验时,同时进行空白实验,再次验证以及确保无菌生理盐水符合要求(空白实验结果:平皿培养基上无菌生长,如有菌生长,则此次实验结果无效,需查找原因并纠正,重新进行实验操作)。
上一篇:培养细菌的四个步骤
下一篇:芭比的小女儿 玫瑰伞裙蛋糕