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pmsf如何配置

今天的这篇经验和大家聊一聊关于pmsf如何配置的问题,希望能够帮助到有需要的朋友。
方法/步骤
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PMSF的配制方法:溶解174mg的PMSF(苯钾基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml,分装成小份贮存于-20℃,使用时终浓度一般为1mmol/L。

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使用介绍:抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中;在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.;

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工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM;在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入);

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注意事项:PMSF(苯钾基磺酰氟)溶解到异丙醇中,不能溶解到水中的。-20℃保存也会有结晶析出,这是正常的,等到温度稍高混匀就可以了。PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一定要注意防护,手套和口罩。

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一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

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PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

注意事项

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