PMSF(Phenyl ['fenəl] Methane [ˈmeθeɪn] Sulfonyl ['sʌlfəˌnɪl] Fluoride)也就是:苯甲基黄酰氟,常用于抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶)的活性,首先这种试剂有剧毒,所以在配置时一定要注意保护自己和他人,做好必要的防护工作。IPTG(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside)就是:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。是β-半乳糖苷酶和β-半乳糖透酶的诱导剂,具有腐蚀毒性。
工具/原料
1
PMSF和IPTG粉末
2
异戊醇或无水乙醇和超纯水
方法/步骤
1
首先将PMSF和IPTG放置于通风橱中,准备好异戊醇(或无水乙醇),超纯水,移液器,配套枪头,合适的干净无菌容器。
2
将PMSF粉末10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中,因为PMSF溶解在水中较不稳定。可以将PMSF的储存在2-8℃多个月。可以在-20℃环境条件下长期保存。
3
将装有IPTG的白色结晶粉末按100 mM溶于水中,按照实验或实际情况配制需要的体积即可。所用超纯水需要先经过过滤处理或者IPTG溶液混匀后再经过过滤也可。
注意事项
这两种试剂均有剧毒,所以,不论在配制还是在使用时都要戴上塑胶手套并穿上实验服
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