450nm波长的酶标仪,移液器,温育设备,吸水纸,蒸馏水
样本要求 该试剂盒所用样本为血清。不要使用溶血、黄疸或脂血样品。注意:含叠氮钠的样品不可用于此实验。1) 样品的采集:血清,静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂治疗的病人样品可能需要更长的凝血时间。2) 样品的储存:2~8℃下可储存5天。长时间储存,需等量分装后在-20℃下或更低温度下冻存,避免反复冻融。冻存的样本在检测之前需解冻并混匀。3) 样品的稀释:实验开始前,样本按照说明书要求进行稀释。如:1:100倍稀释,将10ul样本加入1000ul稀释液中,旋涡混合器上混合10秒(避免气泡)
检测前注意事项1) 手工加样:建议新手操作者每次实验做不超过32个检测孔。或者在三分钟内加完所有的标准品、样品和质控品。2) 自动加样:每次实验可做整板96个检测孔。或者在三分钟内加完所有的标准品、样品和质控品。3) 每次检测都必须运行标准曲线。4) 实验前试剂盒需室温平衡30min.5) 不要混合不同批次的试剂盒中的试剂
检测步骤1) 将所需数量的板条固定到板架上。2) 将标准品、质控品和样品分别用新的一次性吸头吸取到相应的微孔中。3) 加酶联物,并充分混匀。4) 温育。5) 洗板,完成后在吸水纸上拍干。注意:洗板会明显影响实验的灵敏度和精确度。6) 加底物液。7) 温育。8) 加终止液终止反应。9) 在450nm处读取OD 值。
1) 所有试剂和样本在使用之前必须平衡至室温。所有试剂必须混匀但不能起气泡。
2) 一旦检测开始,所有的操作步骤必须进行到底不能中断。
3) 为了避免交叉反应,每一标准品、质控品和样品的取样都必须使用新的取样吸头。
4) 吸光度值是由温育的时间和温度所决定的。在实验开始之前,建议准备好所有的试剂、旋开盖子、将所需检测的微孔板条固定在板架上等。这些准备工作将确保每次的加液步骤所需时间相同,没有中断。
5) 一般来说,酶免反应的强度与时间和温度成线性比例。