dsRNA细胞转染过程(24孔板)
1.提前1天细胞种植
2.转染过程
1
取1ug(50pmol)的dsRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μl。
2
取1.5ul的Entranster-R4000,然后加入24ul无血清稀释液体,充分混匀,制成EntransterTM-R4000稀释液,终体积为25μl。室温静置5分钟。
3
将Entranster-R4000稀释液和RNA稀释液充分混合(可用振荡器振荡或用加样器吹吸10次以上)混合,室温静置15分钟。转染复合物制备完成。
4
将50μl转染复合物滴加到有0.45ml全培养基(可含10%血清和抗生素)的细胞上,前后移动培养皿,混合均匀。
5
转染后6小时观察细胞状态,如状态良好可不必更换培养基,继续培养24-96小时得到结果。
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