实验步骤:非损伤微测技术测定离子流速的试剂配制
2. 离子流测定K离子流测定:1) 将拟南芥种子铺于正常和缺素的培养基上萌发;2) 先4℃成层处理3d,放置于22℃光照培养箱培养7d;3) 观察测定野生型、突变体和超表达株系中的K离子流。Na离子流测定:1) 将拟南芥种子铺于MS培养基上萌发;2) 先4℃成层处理3d,放置于22℃光照培养箱培养7d;3) 然后转移至含有200mM NaCl的MS培养基上处理4d。4) 观察测定野生型、突变体和超表达株系中的Na离子流。
数据处理1) 数据准备:从原始数据中找到Nernst Slope Nernst Intercept(选择合适的校正的结果);从原始数据中找到origin作为V0,origin-X(或者是origin-Y,origin-Z)作为dv,新建EXCEL表格,复制V0和dv到EXCEL共两列数据,保存为.csv格式文件;2) 软件登录:进入网上Mageflux输入网址http://www.xuyue.net/mageflux/打开网页,点击图标中START进入;输入已创建好的名称和密码登录;3) 添加项目:登录之后,点击Project Admin.进入项目管理界面;点击添加一个新项目Add a New Project;4) 选择参数:填写Project Name和Description,然后选择电极测定的位置,即电极相对所测样品的位置,为了操作的方便,一般电极在右边。之后选择坐标,一般都是原点减去X,Y,Z;最后选择离子的参数,即所测的离子种类(Name ),电极运动距离/采样规则(dr),选择效率(eff),扩散系数(D0),校正斜率(Slope),校正截距(Intercept)。然后点击Save Changes;5) 上传文件:在左上角的Select a Project里选择之前的项目名称,点击Go;进入该项,点击上传文件,即点击Upload New CSV File for Flux J Calculation;点击浏览,把保存好的所要计算的.CSV上传,点击Submite the File;6) 成功上传:显示文件已成功上传,“点击这里进行计算”,计算的数据便显示在右边栏;7) 打开数据:“点击下载/在线查看刚刚生成的数据文件-J111.CSV',打开或者保存文件;8) 数据显示:最右边的一栏即为已换算的流速,Flux J;9) 导出数据:把文件保存或者复制数据,用绘图软件做图即可。