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中量血清DNA浓缩提取操作说明(以biog为例)

BIOG cfDNA Enri Kit是常州百代生物研制的专门用于提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液等游离DNA的试剂盒。BIOG cfDNA Enri Kit采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,一次可提取多达1ml血清、血浆等样本,可高效提取其中的微量DNA,克服了国内同类试剂盒1次只能提取300μl血清样本的局限,提高了实验的效率和准确性,目前国内唯一一家。
方法/步骤
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1.     请自行准备:无水乙醇、1.5mL离心管、2.0mL离心管。2.     取出析出液和洗涤液,按以下操作:a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇;9mL加入51mL无水乙醇。b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

2

1.     取2.0mL离心管1支,依次加入1mL血清/血浆样本、100μL溶液E、700μL溶液Q,上下颠倒混匀,室温/4℃静置20分钟。2.     12,000 rpm 4℃离心5分钟,弃上清,收集离心管内沉淀。3.     向沉淀中依次加入200μL裂解液、4μL DNA Carrier、及20μL消化液,漩涡震荡至沉淀完全分散,56℃水浴10 分钟。

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1.     加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。2.     将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置2 min,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。3.     将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。4.     将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 min,离去残留的洗涤液。5.     取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-50 μL 洗脱液,静置3 min,12,000 rpm 4℃ 离心2 min,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项
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裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。

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如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。

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