科研人员做的western blot实验一般需要对其结果扫描后进行灰度分析，一般使用的软件为Image J，今天我们就来学习意下如何用Image J分析WB的实验结果。
工具/原料
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Image J
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Western blot的扫描图片
方法/步骤
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2、完成步骤1后，装好Image J软件后，点击软件上方的File，下拉点击Open，将扫描图片拉入进入软件中。接着点击软件上方的Image，下拉第一个是Type，点击，将其改为8-bit。
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3、点击analyze，下拉点击set measurement，点击图中所勾的四个选项。然后点击ok确定。然后点击process，下拉点击substract background，只勾图中light background一个选项，点击ok即可。
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4、完成第三步后，点击analyze，下拉出现set scale，点击它，弹出一个小框，把unit of length 那个空白框内的英语改为pixels，点击OK即可。
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5、完成前四步后开始点击file下方一些列不规则圆圈，选择心型圆圈，点击出现freehand selections。然后点击Edit，下拉出现invert，点击即可。
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6、最后一步，进行灰度统计。用鼠标选择图中亮色区域，尽可能的把亮色区域全部圈起来。然后点击anlyze下拉出现的measurement，即可弹出你选定区域的灰度统计值。
注意事项
选择freehand，尽可能的将亮色区域圈起来，圈的范围不能太大，要比较精准，不然误差会很大。