在对虾育苗前应先检测水体的弧菌总数,总弧菌数不要超过1000菌落/克(CFU/g),低于100 CFU/g被认为是安全指标,而在接近1000 CFU/g时,则是危险指标。特别注意每克水体中副溶血弧菌的菌落不能超过30个,而哈维氏弧菌更不应该被检测到。
工具/原料
1
烧杯
2
虾苗70只
3
矿泉水货蒸馏水
4
研磨棒
5
无菌吸管
6
TCBS培养基
7
接种环
8
三角涂布棒1个或无菌L型涂布棒
9
酒精灯
10
一次性无菌培养皿(90mm)
方法/步骤:检测方法
1
用杯子或适当容器,装100ml纯净水(矿泉水或蒸馏水),再取约70只虾婶召趴苗放入杯子或容器中,洗净;
2
依虾苗的大小(以虾苗大小与数量表格为准)取适量虾苗放入稀释液中,用研磨棒研磨至虾体粉碎(以看不到整块苗体为标准)
3
静置2分钟,取上清液0.1ml(用无菌吸 管取上清液到刻度处),加入第二支稀释液中,摇匀,再取上清液0.1ml至TCBS 培养基上.
4
用无菌涂菌 棒将液体充分均匀的涂抹于TCBS 培养基上;
5
将培养 基放于30℃静置培养12~24小时后观察;
6
观察时清点培养基上菌落数量,并参照计数方法的采样数量,计算出虾苗弧菌数量
7
TCBS上常见有三种颜色,分别为: 绿色——副溶血弧菌、河流弧菌; 黄色——溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈维弧菌、鳗弧菌; 黑色——肠杆菌科(劫杰如沙门氏菌。因其能代谢产生的硫化物能和培养基里的铁离子反应生成黑色物质) 典型的副溶血性弧菌在TCBS 上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似口香 糖的质感,直径2 mm~3 mm。从培养沫汽箱取出TCBS 平板后,应尽快(不超过1 h)挑取菌落或标记要挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养基上的特征按照产品说明进行判定。
注意事项
1
1.虾苗大小与数量 大小(cm) 0.5=50 0.6=45 0.7=40 0.8=35 0.9=33 1.0=30 数量(只)
2
2.计数方法 弧菌数量计算方式(个/g) 安全弧菌菌落数(个) 培养基菌落数×2000 150以下(黄菌150以下、绿菌25以下)
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