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pcr内标的作用

内标在传统的定量中,它的作用是因为由于传统定量方法都是终点的检测,那经过PCR到达平台后期后是进行检测,而PC啊,经过对数据扩增,到了平台期时,检测重现性会出现级差,那同一个模板在96孔。PC阿姨上做96次的重复实验呢,那得出来的最终结果是有很大的差异的,所以没办法直接从终点产物量推算起,使模块板,那如果加入内标之后呢,可以消除终极产物量所造成的一些不稳定性,不确定性尽管如此,传统的定量方法。只可以做我们平常用的半定量粗略定量操作。pcr内标的作用是什么,下面给大家讲下:
方法/步骤
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第一,如果代侧样品带样品中加入起始拷贝数据的内标,那么它的PCR的反应就会变成双重那双重的PCR反应中就会存在两种模板的竞争。特别是两种模板的起始拷贝数相差比较大的时候,这种竞争会变得更加的明显。由于待测样品的启始拷贝数是不知道的,所以我们是无法加入适当的数量的椅子模板作为内标。因为这个原因,传统定量方法虽然加入了内标,但却只是一种半定量的方法。

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第三个作用。利用外标。准曲线的实时荧光定量PCR是最近测量最准确重现性最好的一种定量方法。他基本上是用于做研究转基因研究,还有药物疗效考核病原体检测等各方面的领域都应用到。

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