工作原理:流动相通过输液泵流经进样阀,与样品溶液混合,流经色谱柱,在色谱柱中进行吸附、分离,最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号,在色谱工作站上出现相应的样品峰。
工具/原料
1
安捷伦1260高效液相色谱仪
2
CDS 2.3工作站
方法/步骤
1
LC开机:开LC各模块。
2
开电脑,点击“联机“,进入仪器控制界面(或从控制面板启动),在功能区/状态,仪器状态版面,点击总启动按钮启动仪器。
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编辑方法:选中功能区/方法,可新建,调用(已有方法),保存、另存为、上传、下载仪器运行方法。
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平衡仪器:在该方法下平衡仪器(柱子及灯),直至10分钟内基线漂移不超过0.5mAu(VWD), 且仪器各模块(功能)均为绿色就绪状态;
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运行单个样品(单针进样):选中功能区/单个样品,在“运行信息”、“自动进样器”、“处理部分”等填入样品相关信息,并运行(采集数据);
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运行序列样品(多针连续自动进样): 1、选中功能区/序列,在序列表中填入各样品对应信息,并运行。 若需运行后关机,可通过控制面板/管理/仪器选项,设置关闭检测器的时间,再提前编好冲柱方法和停泵方法 (流速设为0ml/min),加在序列表最后,即可实现自动冲柱、停泵和关闭氘灯;
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2、在运行中若需编辑序列(添加、删除序列行),点编辑后须“更新”或“取消”,否则序列将不会 运行当前进样之下的序列行:
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冲柱和关机: 1、不使用缓冲盐时:可直接用 100%甲醇冲洗系统 30 分钟以上; 2、使用缓冲盐时: (1)10%甲醇+90%水冲洗系统 60 分钟以上; (2)逐步过渡到 100%有机相再冲洗系统 30 分钟以上。 3、冲柱时可关闭灯; 以上 7.1-7.3 也可通过运行预先编好的冲柱方法和停泵方法实现(在序列最后设置)。 4、退出工作站,关闭 LC 各模块电源,关闭电脑。
注意事项
1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
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