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如何制备出合格的单细胞测序悬液样本?

制备单细胞悬液时,首先要看样本类型,针对已经处于悬浮状态的细胞、磁珠富集的细胞或流式分选的细胞,只需要进行清洗和计数,即可用于单细胞转录组或免疫组分析;但在处理组织类样本时,必须首先通过机械法或酶解法进行解离,为了达到最佳的处理效果,需要对实验方法进行多次优化。
方法/步骤
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对自己样本非常熟悉的老师可以按照自己的方式处理组织样本,如果不知该如何把组织样本制备成合格的细胞悬液,则建议按照下面建议的5步法走:

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第一步:从官网查看10x Genomics单细胞悬液制备官方建议,看是否适用于自己的样本;

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第二步:利用关键词查询与自己样本类型相同的已发表的单细胞测序高分文献,参考文献当中的单细胞悬液制备方法;

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第三步:查看一些知名的protocol分享的网站:例如“Protocol.io”和“Cold Spring Harbor Protocols ”等;

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第四步:目前有一些组织制备单细胞悬液或细胞分选的商业试剂盒,首选10x Genomics官方认证的“Miltenyi 美天旎”品牌,里面有10余种组织消解试剂盒。同时可以去“Worthington”官网上查看组织消解最佳的酶;

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第五步:参考一些在样本保存、组织样本制备、细胞悬液质控中的注意事项。避免发生错误导致制备出不合格的单细胞悬液。以上5步详细内容与步骤可咨询天津生物芯片,您只需将组织样本寄给我们处理即可。PS:信息来自网络,如侵立删。

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