保护柱是高效液相色谱仪中，安装在进样器和分析柱之间，通过流动相和样品溶液。可以预先捕集能被分析柱牢固吸附，不能被流动相所洗涤的物质，保护并延长分析柱使用寿命。像药典专用高效液相柱、中药材专用分析柱、益母草专用柱、利巴韦林专用柱、甘露醇专用柱、益母草专用柱、氨基酸专用柱、槟榔专用柱、乳糖专用柱、人参专用柱、麻黄专用柱、木犀草苷分析柱、葡甲胺专用柱、人血白蛋白专用柱、肝素钠专用柱、国达色谱柱、硫酸软骨素专用柱、头孢他啶专用柱、苯海拉明专用柱、药典专用柱、苦参碱专用柱、抗体专用柱、头孢聚合物专用体积排阻柱、石英毛细管柱等高效液相色谱柱如何选择保护柱呢？
怎么样选择保护柱又不影响分离分析？通常，在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁，对于大部分分析工作来说，一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是，如果样品较脏，或工作中发现经常要更换25px的保护柱，那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多，则其保护性能越好，当然随着保护柱长度的增加，样品的保留时间也相应增加。一般来说，保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或者相当即可。
保护柱的填充方式也很重要，目前有薄膜装填法，填装过程简单方便，而且可以在实验室中进行干装。但是，其最大的缺点是不经济，特别是针对中国的具体情况，一次性使用相对费用较高。另外，薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限，只能提供很有限的保护作用；不过也因为所装填的色谱填料较少，保护柱的长度较短，所以对分析样品的保留时间的影响也很小。
保护柱结构其实就是缩短的分析柱，设计方式上有直接式/手紧式或整体式。整体式设计是由色谱柱的生产厂商直接安装在分析柱上，必须与分析柱一同订货，可以非常方便的使用，但不能改动。直接式结构设计可以在任何时候由色谱工作者来安装连接，可以与任何品牌的色谱柱连接使用，而且可以根据不同的样品选择合适的保护柱长度。手紧式保护柱从结构上讲是与直连式保护柱医药，只是在连接时不用借助扳手等工具，直接用手上紧即可。另外从保护柱结构的角度看，保护柱又分为是否可以更换保护柱的柱芯，现在大多数的保护柱均可以更换柱芯，可以降低保护柱的使用成本。
大多数色谱工作者是根据分析柱的填料来选择保护柱的填料，正常情况下可以选择与分析柱一样的色谱填料。但是，根据实际的分析工作，可不必与分析色谱柱的填料完全匹配。选择保护柱的原则是：在满足分离分析要求的前提条件下，尽可能的选择较短的保护柱，尽可能选择对分离样品保留弱的填料。