HA-HI试验是测定具有血凝病毒抗体的常用方法，是养殖业化验室人员必须掌握的试验技能。操作HI试验需要使用四单位抗原，配置完成后还需进行验证以保证试验的准确性，那么该如何进行验证呢？下面是小编的详细操作示范。
工具/原料
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HA-HI，四单位抗原
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PBS缓冲液，抗原，移液器及吸头，96孔血凝板，1%鸡红细胞等
方法/步骤
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按比例稀释取6个1.5mlEP管，分别加入100微升、200微升、300微升、400微升、500微升、600微升PBS缓冲液，然后每管均加入100微升配置好的四单位抗原，充分混匀，备用。
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PBS铺板将移液器调至25微升，取96孔板一个，每孔各加25微升PBS铺底。
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加稀释过的抗原将按比例稀释过的抗原（1:1、1:2至1:6）依次加入96孔板的第一排内前6孔，重复四次（也就是使用96孔板的前四排）。
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加1%鸡红细胞抗原加入完毕后，最后一步将板子的前四排、每排前6孔分别加入25微升1%鸡红细胞，第5排仅加红细胞作为试验对照，置于25℃反应20min。
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结果读取作用20min后取出板子，读取结果。如果第5排红细胞对照全部流下来说明对照成立。试验前4排孔中，每排第1孔、第2孔、第3孔完全凝集，而第4孔、第5孔、第6孔部分凝集甚至不凝集，则说明四单位验证成功，可以进行下一步试验，否则需要调整抗原或者稀释用PBS的体积。
注意事项
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四单位的验证非常关键，四单位配置的好坏直接影响到试验的最终结果，如有不明白的朋友可以给我留言。
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