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qpcr实验步骤

实验前的准备:每天早上到达实验室的时候,先将超净工作台的紫外线灯开关开启,照射15-20分钟即可。
工具/原料
1

橡胶手套

2

细胞培养皿

方法/步骤
1

超净台前做实验,需要你佩戴干净的橡胶手套或者一次性薄膜手套,RNA抽提需要你带好口罩。

2

取EP管/枪头时需要用镊子,不可以用使用过的手套直接取用。取完EP管/枪头后,袋子必须要及时的封好。

3

细胞培养皿中细胞的样品用1*PBS洗两次后,用1ml枪将PBS吸取干净,加入1ml Trizol (invitrogen)溶液,吹打混匀。

4

加入200μl氯仿后,剧烈振荡混匀大约30s,使水相和有机相充分的进行接触,在室温静置大约3-5分钟即可。

5

4℃下,14,000g离心15分钟,会发现分为三层,RNA在上层水相,移至另一个新的RNase free EP管,使用20-200ul的枪吸取上清。

总结

1.超净台前做实验,需要你佩戴干净的橡胶手套或者一次性薄膜手套。2.细胞培养皿中细胞的样品用1*PBS洗两次后,用1ml枪将PBS吸取干净。3.加入200μl氯仿后,剧烈振荡混匀大约30s。

注意事项
1

注意实验室的清洁。

2

不要携带实验以外物品进入实验室。

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