最近小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于用SDS 法小量提取植物基因的方法的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。
方法/步骤
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首先,取新鲜豌豆叶片,放于用液氮预冷的研钵中研磨,要尽量细。
2
然后,取0.3 g 材料放于1.5 ml Eppendorf管中,加人600 pl 提取液,65C保温10 min。再以8 000 r/min 的转速离心10 min,取上清液。
3
然后,加入600 pl 氯仿,振荡,以13 000 r/min 的转速离心5 min。取上清液,加人2 倍体积的预冷的无水乙醇,再轻轻地颠倒混匀。
4
然后,在以13 000 r/min 的转速离心10 min。弃去上清液,用70%(V/V)乙醇洗涤沉淀两次,在室温风下干。
5
然后,将沉淀溶于30 pl 灭菌的双蒸水中,取10 ug植物基因组DNA,用10U特定限制性内切酶,37C消化8~12 h。
注意事项
上述方法为小编整理所得,希望能够帮助到大家。
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