KI法测定水稻幼苗叶片过氧化氢含量

0.1% TCA，1M KI，10mM PBS（钾盐，Ph7.0），30% H2O2

锆珠，2mL 离心管，液氮

标准曲线制作使用eppendorf移液器及进口枪头吸取30.6uL 30%H2O2 加入1L超纯水中，充分混匀为H2O2母液。母液浓度为300μmol/L,即0.3μmol/ml。按照Tab.1加样，充分混匀，在室温（28℃培养箱）下反应1小时，在紫外分光光度计下测量吸光值。注意使用石英比色皿。做出标准曲线。

样品测量1. 取2ml离心管，加入5粒锆珠，在离心管盖和壁分别记下编号；

2. 称取0.1g叶片，快速剪碎，放入离心管中，迅速投入液氮速冻；3. 将离心机设置4℃预冷

4. 将匀浆器载物盘置入液氮中速冻，转载好，将离心管放入载物盘中；5. 60rpm，150s，震荡研磨，重复一次；

6. 取出离心管至于液氮中，分别取出，加入1.5ml 0.1% TCA，快速混匀，置于冰上。7. 所有样品加完之后，12000rcf，15min，4℃；

8. 取0.5ml上清液到干净的2ml离心管中；9. 加入0.5ml PBS；

10. 加入1ml KI；11. 充分震荡，28℃恒温1小时；12. 390nm 测定吸光值。