LDH释放法检测CIK细胞杀伤活性

检测CIK细胞与PBMC的细胞杀伤活性通常使用LDH释放法具体操作方法如下:1.将5ml/dl小牛血清与RPMI1640混合后的培养液调整靶细胞K562浓度至1×105/ml；2.浓度调整完成后的细胞混合液按照每孔100μl转移至96孔培养板中，每组设定三个复孔,靶细胞自然释放孔(阴性对照)不加效应细胞只加100μl培养液；3.将100μl 1g/dlNP40加入到最大释放孔(阳性对照)中代替培养液；4.在每个实验孔中加入效应细胞100μl，效靶比设置为5ⅪⅥ-20ⅪⅥ；5.3个效应细胞自然释放对照孔用100μl培养液代替靶细胞；6.完成后把96孔培养板放置于培养箱中37℃、二氧化碳浓度5ml/dl培养4-6小时；7.培养结束后用自动生化分析仪检测LDH数值计算活性:杀伤活性(%)=[(实验组A值-总自然释放A值)/(最大释放组A值-总自然释放A值)]×100%。