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BIOG 干血斑 DNA 提取试剂盒说明书

BIOG DNA Dried Blood Spots Kit 研发团队在综合比较了国外同类优质产品的基础上反复研制优化而成,专门用于干血斑DNA 的提取纯化。本试剂盒可从干血斑中提取高质量的基因组DNA。BIOG DNA Dried Blood Spots Kit 采用了最新的优质进口离子膜,结合液、裂解液和洗脱液经过多次优化,提取得到的 DNA 产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于 PCR、荧光定量 PCR 和各种酶切试验等。
工具/原料
1

吸附柱和收集管, 结合液 ,裂解液 ,

2

析出液, 洗涤液 ,洗脱液, 消化液,

方法/步骤
1

1. 请自行准备:无水乙醇、PBS、1.5ml 离心管。2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:a) 析出液:4.5mL 加入 25.5mL 无水乙醇;9mL 加入 51mL 无水乙醇。b) 洗涤液:9mL 加入 21mL 无水乙醇;18mL 加入 42mL 无水乙醇。c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在 37℃溶解,摇匀后使用。

2

1. 取 1.5ml 离心管,加入 1mL 结合液,取干血斑样本(5-9 片 5mm*5mm/片)至离心管中,将离心管置于摇床上,转速 500-600 转/分, 室温,摇动 10 分钟;取出滤纸,5,000 rpm 离心 3 分钟。2. 彻底弃上清,加入 100μLPBS,悬浮沉淀;加入 200 μL 裂解液,20μL 消化液,充分振荡混匀,56℃水浴 10 分钟至细胞完全裂解。3. 加入 500μL 析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA 的提取与后续实验。

3

1. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置 2 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。2. 将吸附柱放回收集管内,加 500 μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm  离心 1 分钟,弃收集管内废液。3. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心 2 分钟,离去残留的洗涤液。4. 取出吸附柱,放入新的 1.5 mL 离心管内,加入 50-200 μL 洗脱液,静置 3 分钟,12,000 rpm 4℃ 离心 2 分钟,收集DNA 溶液。提的DNA 即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项
1

1、 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。

2

裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于 37℃水浴中溶解即可。

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