间充质干细胞整体生长过程分析

间充质干细胞培养时MSC的整体的生长过程可以分为3个阶段分别是潜伏期→指数增生期→停滞期，每一个不同的时期都有各自的特点下面就来详细介绍MSC整体的生长过程。1.潜伏期(latent phase)：是指细胞在接种之后会在培养液中会出现一个呈悬浮状态的悬浮期。这时细胞质会出现回缩，细胞体城圆球形然后细胞 贴附于载体表面,称贴壁,悬浮期结束。细胞贴壁速度与细胞种类, 培养基成分,载体的理化性质等密切相关。一般情况下，原代培养细胞贴壁速度慢,可达 10-24 小时或更多, 而传代细胞系贴壁速度快, 通常10-30分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期。原代培养细胞 潜伏期长，约24-96 小时或更长, 连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期短，仅需6-24 小时。2.指数增生期(logarithmic growth phase)：这是细胞增殖最旺盛的阶段，分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定 细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数（Mitotic index, MI）表示，即细胞群中每1000 个细胞中的分裂相数。一般细 胞的分裂指数介于 0.1%-0.5% ，原代细胞分裂指数较低，而连续细胞和肿瘤细胞分裂相指数可高达3％－5％。指数增生期的细胞活力最好时期，是进 行各种实验最佳时期，也是冻存细胞的最好时机。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续 3－5 天后，随着细胞数量不断增多、生长空间减少，最后细胞 相互接触汇合成片。正常细胞相互接触后能抑制细胞运动，这种现象称接触抑制现象(contact inhibition)。而恶性肿瘤细胞无接触抑制现 象，能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（piled up）。细胞接触汇合成片后，虽然发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍能 进行增殖分裂，因此细胞数仍然在增多。但是，当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养枯竭和代谢产物的影响，导致细胞分 裂停止，这种现象称密度抑制现象（Density Inhibition）。3.停滞期(Stagnate phase)：这时细胞的数量会几近饱和密度，如果这时候不进行传代培养那么细胞就会出现停止生长的情况，这就说明细胞进 入了停滞期。细胞的数量会呈现一个稳定状态因而也称其为平台期（Plateau phase）。细胞虽然在此期间不会增值但是依然会进行新陈代谢，因为细 胞的密度达到峰值不将其进行分离传代那么培养瓶中的营养物质就会慢慢消耗殆尽，同时代谢产物便会堆积、PH下降等等情况就会相继出现最终导致细胞中毒引起 细胞形态的改变贴壁性会减弱出现细胞脱落，严重时便会出现细胞大量死亡等状况。因此达到停滞期后应该及时传代培养。