人脐带MSCs贴壁培养法

1.准备足月生产胎儿的脐带要求孕期无任何不良疾病并且取得过程中在无菌条件下进行，将其浸入1%的双抗(请链霉素)DMEM培养基中，使用玻璃容器密封好运送至实验室；2.获得的脐带置于生物安全柜中剪取10cm长度用生理盐水将其中的血污清洗干净；3.任取脐带一端用解剖刀在离顶端1厘米处的圆周把外表皮划开，然后用夹子将其固定住，再取两把镊子用力将外表皮撕下，接下来再将两根动脉血管分离，最后将静脉内皮剔除；4.分离干净的脐带按1mm²毫米大小剪碎成肉肉块；5.准备150cm²厘米的培养瓶，然后将其平倒，把已经剪碎的脐带组织铺满瓶身(在剪块时要求每个小块大小合适，瓶子中铺脐带时也需要放置均匀)；6.小心反转将培养瓶倒置，放入37℃5%CO2培养箱中，在细胞贴壁一段时间后在培养瓶中加入赛尔生物特质脐带间充质原代培养基后小心翻转培养瓶，这时注意不要冲起组织块。7.细胞培养5天后更换赛尔生物特质脐带间充质原代培养基继续培养，10天后可以使用赛尔传代培养基进行传代培养。这种方式最大的优势在于，原代培养时并没有使用到消化酶，这样就能够保证细胞的纯度，完全依靠细胞自身的能力离开脐带组织贴壁生长。培养出的细胞会更加健康更加纯净，并且操作简单不容易失败。