人脐带MSC培养基使用方法

人脐带间充质干细胞培养基使用方法：1.使用显微镜观察细胞融合率超过80%方可进行传代培养；2.把培养基用37摄氏度水浴进行预热；3.去除掉原培养瓶内的培养基(此过程需要在超净台内完成)，用适量PBS清洗，然后使用1毫升0.25%胰酶-EDTA消化细胞；4.使用显微镜进行观察，当细胞变圆并且开始出现脱离瓶壁时，使用5毫升的人脐带间充质干细胞培养基终止消化；5.将瓶壁上剩余的细胞用移液器轻轻吹打并将其打散；6.室温、200g离心力、离心5分钟；7.弃上清,加入15-20ml的人脐带间充质干细胞完全培养基重悬细胞后转入3-6个细胞培养瓶中或按适当比例接种到细胞培养瓶中（细胞贴壁后融合度在20%左右），细胞密度在1x104cells/cm2，轻摇细胞培养基，确保细胞均匀分布；8.将得到的培养瓶培养于无菌、37摄氏度、5%CO2的培养箱中；9.每两天为一个周期进行换液使用新鲜、预热的人脐带间充质干细胞完全培养基操作。