此篇经验也是毕赤酵母电转化方法
方法/步骤
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菌体的准备：
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1. 挑取酵母单菌落，接种至含有5ml YPD培养基的50ml三角瓶中，30℃、250-300r/min培养过夜； 2. 取100-500μl的培养物接种至含有500ml新鲜培养基的2L三角摇瓶中，28~30℃、250-300r/min培养过夜，至OD600达到1.3~1.5；
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3. 将细胞培养物于4℃，1500g离心5min，用500ml的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬； 4. 按步骤3离心，用250ml的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬；
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5. 按步骤3离心，用20ml的冰预冷的1mol的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬； 6. 按步骤3离心，用1ml的冰预冷的1mol的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬，其终体积约为1.5ml；
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7. 备注：可将其分装为80μl一份的包装冷冻起来，但会影响其转化效率（2周之内）。
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电击转化：
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8. 将5~20μg的线性化DNA溶解在5~10μl TE溶液中，与80μl的上述步骤6所得的菌体混匀，转至5px冰预冷的电转化杯中；
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9. 将电转化杯冰浴5min； 10. 根据电转化仪提供的资料，参考其他文献及多次摸索，确定合适的电压、电流、电容等参数，按优化的参数，进行电击；
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11. 电击完毕后，加入1ml冰预冷的山梨醇溶液将菌体混匀，转至1.5ml的EP管中； 12. 将菌体悬液涂布于MD或RDB平板上，每200~600μl涂布一块平板；
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13. 将平板置于30℃培养，直至单个菌落出现。
注意事项
推荐：电压1.5kV；电容25μF；电阻200Ω。电击时间为4～10msec