主要试剂
1. 0.2％ NaOH 溶液
2. 6 mol/LHCl 溶液
3. 95％乙醇
4. SDS-缓冲液：0.3% SDS，0.1 mol/L NaCl，0.05 mol/l 乙酸钠，用乙酸调到 pH5.0
5. 饱和酚液：重蒸苯酚用4溶液饱和
6. 氯仿一异戊醇液：24 ：1(V/V)
7. 含2%乙酸钾的95％乙醇溶液
8. 无水乙醇
9. 乙醚
主要设备1. 离心机2. 干燥箱3. 恒温水浴4. 真空千燥器5. 天平6. 751 型分光光度计7. 冰箱8. 量筒（50ml）9. 蒸发皿10. Eppendorf 管（1.5 ml）11. 烧杯（50m1，100ml）
实验材料鲜酵母或干酵母粉，pH0.5一5.0的精密试纸。
1. 酵母核蛋白的提取称取鲜酵母 30g 或干酵母粉 5g, 倒入 100ml 的烧杯中。加入 40ml 0.2%NaOH 溶液，在 20-40℃水浴上搅拌提取 30-60min 后 4000r/min 下离心 10min, 取上清液于 50ml 的烧杯中，并置于放有冰块的 250ml 烧杯中冷却，待冷至 10℃以下时，用 6mol/L HCl 小心地调节溶液的 pH 至 3.0 左右。随着 pH 下降，溶液中白色沉淀逐渐增加，到等电点时沉淀最多（注意严格控制 pH ）。 pH 调好后继续于冰水中静置 l0min ，使沉淀充分，颗粒变大。将此悬浮液以 3000r/min 离心 20min ，倒掉上层清液。将沉淀物转入蒸发皿内，放入真空干燥器或干燥箱中干燥之后称重，这就是酵母核蛋白粗品。2. 苯酚法提取酵母 RNA 取上述核蛋白研碎，加 10ml SDS-缓冲液使成匀浆，洗入各 Rppendorf 管（略少于管容积的一半），室温静置 10min ，再加等体积的饱和酚液，室温下剧烈振荡 5min 后置冰浴中分层， 4000r/min 离心 10min ，吸出上层清液，转入新的 Eppendorf 管，加 2 倍体积 95％乙醇（含2％乙酸钾），在冰浴中放置 30min ，使 RNA 沉淀。再以 10 000r/min 离心 5min ，弃上清液，沉淀用少许无水乙醇和乙醚各洗一次，迅速离心各 lmin ，保留沉淀。倾去乙醚后，减压真空干燥，准确称重，记录。 3. 结果处理1) 计算核蛋白提取率2) RNA 含量测定将干燥后的 RNA 产品配制成浓度为 10~50 μg/ml 的溶液，在 751 型分光光度计上测定 260nm 处的吸光度，按下式计算 RNA 含量：式中， A260 为 260nm 处的吸光度； L为比色杯光径（cm）； 0.024 为 1ml 溶液含 1ugRNA 的吸光度。3) 计算 RNA 提取率
注意事项
1 .利用等电点控制核蛋白析出时，应严格控制 pH 。
2 .用苯酚法制备 RNA 过程中，用乙醇沉淀得到的 RNA 中，除 RNA 外还含有部分多糖，本实验用用 2% 乙酸钾去溶解非解离的多糖以达到纯化 RNA 的目的。