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液相色谱中关于六通阀和色谱柱的使用和维护

液相色谱对于多数人来说都是很好上手的仪器了,但是就算是用过几年、经验丰富的分析员也会忽略一些问题,一下列举六通阀和色谱柱的使用和维护的注意事项
方法/步骤
1

六通阀正确维护和使用——样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。

2

六通阀正确维护和使用——转动阀芯时不能太慢,更不能停留在中间位置,否则流动相受阻,使泵内压力剧增,甚至超过泵的最大压力;再转到进样位时,过高的压力将使柱头损坏。

3

六通阀正确维护和使用——为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水冲洗。

4

色谱柱的使用和维护——色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。

5

色谱柱的使用和维护——调节流速太快:避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

6

色谱柱的使用和维护——反冲色谱柱:一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

7

色谱柱的使用和维护——预柱和保护柱:选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

8

色谱柱的使用和维护——避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

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