多语言展示
当前在线:1313今日阅读:22今日分享:22

feulgen反应实验注意事项

5HCHO+4MnO4(-)+12H(+)=5CO2+4Mn(2+)+11H2O甲酸具有特殊性。可认为含醛基,会再次氧化为碳酸,碳酸不稳定,分解为二氧化碳。显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响,故染色具有DNA特异性。准确的温度和盐酸浓度,适宜的水解时间是成功的关键。水解过度或不足均降低染色强度。高等动植物细胞核中碱性蛋白质(组蛋白,鱼精蛋白等)与其它相结合,而以脱氧核糖核蛋白的形态而存在。细胞质中特别是线粒体、叶绿体等也有少量DNA存在。高分子量的 DNA在溶液中易被机械的切断,从噬菌体和病毒以外的材料提取的DNA。
推荐信息