在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化发生在染色质浓缩、DNA片断化和细胞皱缩之前，因而可用来指示细胞的早期凋亡现象。以BIODAI 中Annexin V双染色法为例。
工具/原料
1
Annexin V；流式细胞仪；荧光显微镜
2
1x Binding Buffer；PI染液
方法/步骤
1
1) 悬浮细胞：300g，4℃，离心5min，收集细胞。贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300g，4℃，离心5min，收集细胞。胰酶消化时间不宜过长(见注意事项)，以防引起假阳性。
2
1) 用预冷的PBS洗涤细胞两次，每次均在300g，4°C离心5min，收集1-5×105细胞。注意:在洗涤细胞时，尽量避免损伤细胞。
3
1) 加入100µl 1×Binding Buffer重悬细胞。加入5µl Annexin V-FITC和5µl PI，轻轻混匀。
4
1) 避光、室温反应10 min。2) 加入400µl 1 x Binding Buffer，混匀，样品在1小时内用流式细胞仪或荧光显微镜检测。
注意事项
本试剂盒所有组分均在4-8℃保存，长期不用可将Annexin V-FITC放-20℃保存。
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