酵母缺陷型培养基原理

酵母缺陷型培养基原理：酵母菌的质粒筛选通常基于营养缺陷型突变菌株的使用而开展，这些菌株在缺乏某种特定培养基组分（比如氨基酸，嘌呤或嘧啶）的情况下无法生长。当转化含有突变基因的质粒后使得阳性转化克隆能够在缺乏必需营养组分的培养基内生长，正因如此，省却成分培养基添加剂/选择性氨基酸混合物（DO medium supplements）能用来筛选成功转化的酵母培养物。酵母营养缺陷型培养基：酵母选择营养缺陷型培养基（Synthetic Dropout Media, SD Media）多用来营养缺陷型标记基因的筛选和酵母转化。这类培养基的配制根据商业化产品的区别有两种方式。第一种方式：无氨基酸酵母氮源基础＋葡萄糖＋选择性氨基酸混合物（YNB without amino acids + glucose+ DO Supplement）第二种方式：酵母基本培养基SD Base+选择性氨基酸混合物（Yeast Minimal Base——SD Base + DO Supplement）1、商业化SD Base与YNB的差别在于前者已添加葡萄糖。2、有研究显示，葡萄糖与氨基酸一起高压灭菌会发生化学反应，培养基会变色，由浅黄到深褐色不等，可能对细胞的生长产生一些影响，但一般情况下不会影响实验。因此，很多实验室经过验证或通过对自身实验体系的评估，还是倾向用【第二种方式】来配制选择性缺陷完全培养基。3、建议客户根据自身需求来选择产品和配制培养基。主要应用：1.营养缺陷型表型的确认。2.酵母转化阳性菌株的筛选。3.酵母双杂交筛选。4.酵母单杂交选择。