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杂交与杂交后清洗的步骤

最近小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于杂交与杂交后清洗的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。
方法/步骤
1

首先,进行预杂交操作,将HIV基因芯片漫人预杂交液,42'C中温育45min。

2

然后,用去离子水进行清洗,取出芯片,用MilliQ水室温下洗5 次;在异丙醇中浸一下,再空气中进行自然干燥。

3

然后,标记样品的将两种荧光标记的样品分别与等体积、42'C预热的2X杂交液混合,使荧光标记的DNA准备样品浓度均为2mg/L,95'C变性5min,以最大转速离心2min。

4

然后,进行杂交后清洗,将上述杂交样品加到预杂交处理过的芯片上,小心地盖上盖玻片,以防产生气泡。

5

然后,进行分子杂交,放人杂交盒,并在其两端的小孔中各加人10pl水保持湿度,42C水浴杂交16~20h,打开杂交盒,轻轻取出芯片,不要移动盖玻片。

6

最后,将芯片迅速漫人洗脱液1中,在42'C下,轻轻摇晃4min,将芯片转移至洗脱液2中,室温下轻轻摇晃4min,3 将芯片转移至洗脱液中,洗脱l1min,重复4次,用蒸馏水冲洗玻片,<10s,用无水乙醇清洗,在空气中干燥。

注意事项

上述方法为小编整理所得,希望能够帮助到大家。

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