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1%鸡红细胞制备方法

1%鸡红细胞是进行HA-HI(血凝-血凝抑制)试验的必备材料之一,而HA-HI试验是动物医学专业必须掌握的专业技能操作。那么,该如何制备呢?恰巧小编近日刚刚操作了此项试验,现与大家分享。
工具/原料

新鲜抗凝血,100ml青瓶,15ml离心管,PBS缓冲液等

方法/步骤
1

准备好试验所需的所有材料,包括离心管、低速离心机、试管架、PBS缓冲液(生理盐水)、注射器、100ml大青瓶及塞子等等。

2

抗凝血第一次离心。用注射器采集若干毫升抗凝鸡(鸭)血,根据需要确定。将抗凝血缓慢注入离心管内,盖好盖子后将离心管放入离心机,配平后1500r/min离心5min,离出抗凝剂及血浆等。

3

第一次离心结束后,将上层液体及白细胞层用注射器吸出,加入适量PBS缓冲液,配平后进行第二次离心,1500r/min离心5min,进一步清洗红细胞。

4

第二次离心结束后,同样吸出上层液体及白细胞层,再加入适量PBS缓冲液,配平后进行第三次离心,2000r/min离心10min,进一步清洗红细胞。

5

离心结束,最后一次吸出上层清液。量取99mlPBS缓冲液加入100ml大青瓶(或其他容器),用注射器(或其他,如吸管)吸取1ml洗净的红细胞,缓慢加入99mlPBS缓冲液中,塞紧瓶塞。

6

1%红细胞制备好后,一般置于4℃冰箱保存,用时充分混匀即可。

注意事项
1

本实验所用材料为本实验室常用材料,不代表全部

2

操作试验时尽量佩戴手套

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