无论人工繁殖或自然繁殖，在幼年娃娃鱼阶段， 雌雄性别区分是很困难的， 只有在大鲵接近性成熟阶段之后， 才能分辨出雌雄。 而在成熟后大致有以下几个方法可以分辨娃娃鱼的性别。
工具/原料
娃娃鱼
方法/步骤
1
从外观上，成年雄性体型较大，雌性体形较小。
2
从活动上，雄体活泼灵敏，雌体腹部肥大，行动迟缓。
3
从生殖系统上，雄体泄殖腔孔隆起，特别在生殖季节，孔裂长，有明显绒毛状乳突，甚至向外凸出，而雌体的泄殖腔孔平伏，孔裂较短，无明显乳突。具体操作如下。
4
将大鲵以背贴地, 以腹朝天( 防止大鲵袭击人),。
5
拨开娃娃鱼的泄殖孔。
6
若内有一圆形勾齿者为雌性, 长圆形勾齿者为雄性, 个别雄性在泄殖孔周边有小米粒样突起。
7
其他也可借用B超机和激素检测。
注意事项
在检查时，娃娃鱼可能会伤人，请小心。
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