脾脏是机体重要的免疫器官之一，脾脏中含有大量的淋巴细胞。在老鼠中，由于老鼠血液量少，故经常需要从老鼠脾脏中获取大量的淋巴细胞，主要是T/B细胞，用于体外免疫实验。 小鼠脾脏中各类细胞所占据的比例可参考一下图片或者参考资料。
工具/原料
1
活体小鼠
2
小鼠解剖器具
3
PBS溶液
4
细胞培养基：RPMI-1640 （Invitrogen) +10% 胎牛血清FBS （GIBCO）+1%双抗P/S （GIBCO）
5
细胞筛（BD）
6
培养皿
7
细胞培养瓶
8
常用移液管及移液枪
方法/步骤
1
颈椎脱臼法处死小鼠。解剖小鼠腹部。扒开内脏，可看到如图所示的长约3-4厘米呈长条状的深红色组织，即为脾脏；
2
将分离得到的脾脏组织浸泡在干净的PBS溶液中；
3
在一个培养皿中加入适量的PBS溶液，放一个细胞筛，将脾脏取出放于细胞筛中。取干净的注射器，用其按压处的末端对组织进行碾压。膜内细胞会慢慢游离出来，经过细胞筛之后，悬浮在培养皿溶液中；
4
洗一洗细胞筛，收集细胞筛外PBS，400g, 50ml离心管离心，15min；
5
去上清，加红细胞裂解液2ml，重悬。37度2min；
6
离心400g，15min，PBS 5ml洗一遍，离心400g，除去上清；
7
细胞培养基重悬5ml，除去其中不可溶的组织纤维，悬浮液取100ul细胞计数；
8
稀释细胞，培养或者铺板。
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