ELISA的检测看制备出来的抗体是否符合标准
工具/原料
蛋白、多肽、漩涡混合器、聚乙烯板、pbst、兔抗、封闭剂、显色液a、显色液b、硫酸、酶标仪
方法/步骤
1
包被:取蛋白20ul 多肽5ul 放入1ml包被液中用旋涡混合器混匀，取150ul加入聚乙烯板中，37摄氏度包被2小时。包被好后，用pbst清洗三次，每次五分钟。
2
封闭：加封闭剂150ul，37摄氏度封闭一小时。封闭好后，用pbst清洗三次，每次五分钟。
3
一抗：取4ul的抗体加入1ml的封闭剂中充分混匀，加150ul到聚乙烯板中，37摄氏度一小时。用pbst清洗三次，每次五分钟。
4
二抗：加兔抗加入封闭剂中（1：8000）混匀，加150ul到聚乙烯板中，37摄氏度一小时。用pbst清洗三次，每次五分钟。
5
显色：显色液A与显色液B（1：1）混合，放在暗处，取125ul，放入暗处10分钟。
6
终止：加2m的硫酸