多克隆位点名词解释是什么

多克隆位点（英语：multiple cloning site、polycloning site，MCS）又称多重选殖位，也称多位点人工接头（英语：polylinker）简称多接头，是指人工合成的一段DNA序列。作为DNA载体且含有多个限制内切酶识别位点（最多可达20个），能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。工程质粒（engineered plasmid）中常含 MCS，可让一段或多段 DNA 插入该区域中，此工程质粒作为载体，可接着再插入另一端 DNA 或（细菌、真菌）宿主中。有时随语境不同，“多接头”是指这种基因工程的工具，而“多克隆位点”是指利用多接头插入后形成的识别位点。在某些情况下，向量可能不包含 MCS。相反，可以将 MCS 添加到向量中。第一步是设计互补的寡核苷酸序列，该序列包含限制性酶切位点以及末端的附加碱基，这些碱基在消化后与载体互补。然后可以将寡核苷酸序列退火并连接到消化和纯化的载体中。用补充寡核苷酸插入突出端的限制性内切酶切割消化的载体。连接后，将载体转化为细菌并通过测序验证插入。此方法还可用于向多克隆位点添加新的限制位点。用途多克隆位点是一种允许插入外源 DNA 而不会破坏质粒其余部分的功能，这使得它在生物技术、生物工程和分子遗传学中非常有用。 MCS 可以帮助制造转基因生物，通常称为使用基因工程的转基因生物(GMO)。为了在基因工程中利用 MCS，当 MCS 被切开时，必须在生产过程中将感兴趣的基因添加到载体中。在制作并连接 MCS 后，它将包含感兴趣的基因，并且可以扩增以增加细菌宿主中的基因拷贝数。细菌复制后，可以将感兴趣的基因从细菌中提取出来。在某些情况下，表达载体可用于产生蛋白质产物。产品分离后，具有广泛的用途，例如生产胰岛素、生产疫苗、生产抗生素和创建基因疗法。